PRRS阳性是什么？养猪人，不懂你就麻烦大了！

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本研究对69个PRRS-阳性母猪场进行PRRSV活疫苗免疫情况和隔离设施的分析，以监测引进的后备母猪的在第一次人工授精时的PRRSV感染状况。

介绍

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是威胁全球养猪业包括丹麦的一种重要疾病病原。猪群在感染PRRSV或接种PRRSV活疫苗后，血液样品检测检测时会有一段时间的病毒血症，因此易将病毒传播给PRRSV阴性猪。在丹麦，对于PRRS-阳性母猪场，建议后备母猪引进后施行12周的隔离驯化。

本研究的目的是比较69个PRRS-阳性母猪场进行PRRSV活疫苗免疫情况和隔离设施，以监测引进的后备母猪的在第一次人工授精时的PRRSV感染状况。此外，本研究还将对抗体水平进行评价。

材料和方法

本研究对象为丹麦的69个PRRS-阳性母猪场。每个猪场后备母猪第一次人工授精时各采取5份血液样本进行RT-qPCR、ELISA和IPMA实验室检测。并对这些猪场进行后备母猪引进策略与免疫程序的问卷调查，搜集数据以进行后期分析。

后备母猪状况分析数据为是否隔离、隔离时间和后备母猪引进方案(外购或本场培育)。抗体水平分析为ELISA和IPMA检测(根据疫苗免疫时间、免疫猪群日龄进行分析)。

图1 69家猪场后备母猪引进策略

图2 69家猪场后备母猪隔离情况

表1、隔离设施情况（46家有隔离的猪场）

备注：*，有1家猪场数据错误，排除

结果

69家猪场中，40家(58%)为外部引种，22家(32%)为本场培育，其余7家2种策略都有。70%外部引种的后备母猪进行了隔离，本场培育的后备猪种仅50%猪群采取了隔离措施。此外，仅10家猪场具有符合标准的隔离设施，隔离期时间为8-16周。

实验室检测显示，63家猪场为PRRS稳定猪群，6家为不稳定。稳定猪群是指RT-qPCR检测阴性(病毒血症阴性)，ELISA检测阳性(抗体阳性)。所有猪场RT-qPCR检测均为阴性，但有6家猪场样本PRRSV抗体检测为阴性，因此定义此6家猪场为PRRS不稳定猪场。

统计学结果显示，是否隔离、隔离时间、后备母猪引进策略等因素在稳定猪场与不稳定猪场间差异并不显著，但使用隔离设施会使猪群状况更倾向稳定。接种日龄与第一次人工授精时猪群的抗体水平差异不显著。

讨论

理论上来说，无隔离措施的后备猪群实验室检测时应为病毒血症阳性，然而，活疫苗接种后病毒血症持续期为4周左右，而样本采集平均时间为18周左右(第一次人工授精时)。因此，样本检测结果均为PRRS病毒阴性。6家猪场抗体检测阴性说明后备母猪在第一次人工授精时尚未进免疫接种或抗体水平下降。此6家猪场在配种前均已免疫了活疫苗，而理论上抗体水平应持续18周左右，所以此结果表明，此6家猪场的抗体水平在下降。阴性后备母猪妊娠期易受病毒感染，并易导致病毒在分娩舍的传播。

结论

本研究结果显示丹麦69家PRREV阳性猪场中，尽管隔离条件和措施相差较大，但在实验室检测结果中均为病毒血症阴性。然而，持续引进阴性后备母猪，免疫效果监测不到位，可能会导致产生PRRSV易感猪群，并导致临床PRRS的爆发。因此，需严格监测PRSV阳性稳定猪场后备母猪PRRSV疫苗的免疫效果。

◤ 本场留种后备母猪一样需要隔离 ◢

原作者：Bonnie Edahl Hoelstad，丹麦

译者：谢小雨

文章来源：https://www.pig333.com/

谢小雨

中级兽医师

致力于猪场疫苗临床应用、抗体检测与分子流行病学调查工作，在疫病监控方面具有很高的理论背景与丰富的实践经验。

哈兽研田志军和张洪亮团队：PRRSV-1已在中国超过23个地区流行

近期，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所张洪亮、田志军为通讯作者的论文，为我们介绍了PRRSV-1在国内的最新研究进展。重点从中国PRRSV-1的流行情况、基因组特征、致病性、疫苗状况和防控管理体系等方面进行了阐述。

冠牧精准诊断对该内容进行了整理编辑，希望能为国内PRRSV的防控尽微薄之力。

一、PRRSV-1在中国的出现和流行情况

PRRSV-1首次于1991年在荷兰报道并分离，2011年国内首次报道了在猪场内检测到PRRSV-1野毒株。我国进口种猪主要来自美国、丹麦、法国、英国、加拿大等地区，这些国家均有过PRRSV-1的爆发情况。因国内禁止使用PRRSV-1弱毒活疫苗（MLV），因此PRRSV-1有一定概率通过进口种猪传入中国。

近年来，国内PRRSV-1毒株检出数量迅速增加。迄今为止，在中国，PRRSV-1感染至少在23个地区持续流行，广泛分布于中国中部、北部、南部、东部、东北和西南地区。

图1 截至2023年3月，中国已检测到PRRSV-1的地区（黄色标记）

二、 PRRSV-1在中国的分类

通过对PRRSV的系统发育进行分析，中国分离到的所有PRRSV-1毒株均属于1亚型。前期研究表明，中国PRRSV-1可进一步分为4个亚组，包括BJEU06-1-like、Amervac-like、HKEU16-like和NMEU09-1-like。近期研究表明，BJEU06-1-like已成为我国部分地区PRRSV-1的主要亚群。

图2 基于ORF5的系统发育分析

（A）和基于全基因组的系统发育分析（B）中国RPPSV-1毒株用▲标出，2018年后检出的毒株用红色字体表示

作为PRRSV-1的主要亚群，BJEU06-1-like亚组比其他亚组传播范围更广，但大多数病例集中在中国北方地区。从监测数据发现，广东省发现的亚组最多，表明PRRSV-1在广东省的传播较为严重。

图3 PRRSV-1各亚组在中国的分布情况

（图A：BJEU06-1-like；图B：NMEU09-1-like；图C：HKEU16-like；图D：Amervac-like；图E：新亚组）

三、 中国PRRSV-1基因组特征

有研究报道PRRSV的核苷酸取代率是RNA病毒中最高的，PRRSV-1和PRRSV-2都是引起PRRS的病原体，但它们之间的同源性仅为50~70%。

中国PRRSV-1同源性分析

中国PRRSV-1亚群之间存在较大变异性,基因组同源性为81.5-93.5%。结合各亚群的地理分布特征分析，变异性较高的亚群（如BJEU06-1-like、NMEU09-1-like等），分布更为广泛和分散。这表明,目前中国PRRSV-1毒株变异程度较高，中国PRRSV-1变异性的增加无疑增加了PRRSV-1传播的风险以及感染的防控难度。

表1 中国PRRSV-1毒株不同亚组间/内的核苷酸序列同一性(%)

PRRSV-1在中国的重组

重组被认为是导致PRRSV遗传多样性的重要因素之一。由于PRRSV缺乏聚合酶校对，其复制很容易出现错误和突变。当两种不同的PRRSV毒株感染同一细胞时，它们的部分基因组序列可以在基因组RNA合成过程中交换，然后发生基因组重组。

下表中法国、丹麦两个重组毒株均比亲本毒株表现出更高的传播性和致病性。PRRSV的持续重组可能会降低疫苗的保护作用并增加流行病学监测难度。

表2 中国PRRSV-1重组毒株和国外PRRSV-1疫苗重组毒株

中国 PRRSV-1 Nsp2 、ORF3/4 重叠区的特征

Nsp2 是 PRRSV 非结构蛋白中变异最大的蛋白。研究者比较了34株PRRSV-1株（包含31株中国PRRSV-1株和3株在NCBI上有完整基因组的国外代表性PRRSV-1株）Nsp2区域的氨基酸序列，结果显示存在多种缺失形式，表明Nsp2的高度变异性。

ORF3/4 重叠区作为除 Nsp2 之外的另一个高变区，其缺失在 PRRSV-1 分离株中很常见。

四、 PRRSV-1的致病性

在既往研究中，大多数中国PRRSV-1感染病例比PRRSV-2感染病例表现出更轻的临床症状、更弱的致病性、更低的病毒载量和更少的临床症状，因此，PRRSV-1的研究一直未受到大家的重视。但PRRSV-1的高致病性毒株已有报道，如发生于俄罗斯的WestSib13毒株，在7天内导致5头猪的全部死亡。

表3 不同PRRSV-1菌株的致病性比较

五、PRRSV-1的诊断方法

PRRS检测在其临床防治中发挥着重要作用。除了通过直观的临床症状进行诊断外，目前还有一系列基于核酸和抗原/抗体的检测方法可用于检测 PRRSV。其中RT-PCR检测方法逐渐成为PRRSV抗原检测方法的主流，同时抗体ELISA检测因其简单、快速、灵敏且易于标准化而被广泛用于PRRSV血清学抗体的检测，特别适合用于开展大规模的流行病学调查和监测。

六、PRRSV-1感染的预防和控制

目前，用于预防和控制PRRS的主要商品化或开发中的疫苗包括灭活疫苗、MLV、亚单位疫苗、DNA疫苗和病毒载体疫苗，其中，世界上最常用的PRRSV疫苗是PRRSV MLV，它是1994年在美国推出的第一个商业化PRRS疫苗。PRRSV-MLV 可以减少病毒在受感染猪体内的传播，并诱导针对同源野生型毒株的保护性免疫反应。然而，PRRSV-MLV 仅提供部分保护或不提供针对异源毒株的保护。此外，PRRSV-MLV在复制过程中存在产生疫苗株或与野生株重组的风险。因此，合理使用疫苗，进一步加强国内PRRSV-1 MLV的管理和输入性动物疫病的监测非常重要。

表4 常见商业化 PRRSV-1 MLV 疫苗

中国主要采取生物安全管理等策略来预防和控制PRRSV-1感染。如：

● 应建立良好的饲养机制，保持营养均衡，保证猪场适宜的饲养环境和合理的饲养密度。

● 要严格控制生猪流动，确保生猪运输作业规范化。

● 应隔离传染源，做好生物安全防控，规范科学使用疫苗，制定合理的病毒治疗方案，定期监测各地PRRSV-1流行情况。

七、冠牧精准诊断学习心得

① 因PRRSV较易变异/重组的特性，各研究机构、养殖集团应加强对重组毒株流行情况和致病性的监测；

② 国内并没有商品化的PRRSV-1疫苗，生物安全防控是对于国内PRRSV较为合理有效的防控措施；

③ PCR检测是发现和鉴别蓝耳病最有效的方法之一，利用唾液或睾丸液、断尾液可简易、快速且有效的进行猪群蓝耳病感染状态监控；

④ 冠牧精准诊断有一系列的PRRSV荧光定量PCR检测试剂盒，可鉴别/分型PRRSV-1、PRRSV-2各种毒株，为您防控好PRRSV，降低生产成本和疫病损失提供了有效的工具。

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